Zastosowanie technik sprzężonych w analizie specjacyjnej selenu w napojach roślinnych

Materiały i metody

W badaniach został wykorzystany chromatograf cieczowy 1260 Infinity II LC System, Agilent Technologies, w połączeniu z tandemowym spektrometrem mas z jonizacją poprzez elektrorozpraszanie, Agilent 6460 Triple Quad, z zastosowaniem kolumny chromatograficznej HILIC Luna 3u, Phenomenex, USA, o wymiarach 150 mm x 2 mm x 3 µm. Faza ruchoma A: 25 mM HCOONH₄ (pH 5), B: ACN, przepływ fazy ruchomej: 0,3 mL min^-1, objętość nastrzyku: 5 µL. Próbki rozdzielano za pomocą elucji gradientowej: 80% A (4 min), 50% A (8 min), 80% A (8 min). Przed przystąpieniem do analizy związków selenu w napojach roślinnych przeprowadzono optymalizację parametrów pracy aparatu. Optymalizowanymi parametrami były napięcie fragmentora, ciśnienie rozpylacza i napięcie przyłożone do kapilary. Warunki pracy detektora przedstawiono w tab. 2.

Tab. 2. Warunki pracy aparatu ESI-MS/MS

Próbki napojów roślinnych do analizy HILIC-ESI-MS/MS przygotowano poprzez wstępne frakcjonowanie przy użyciu kolumny wykluczania (SEC), wybrane frakcje poddano liofilizacji, rozpuszczeniu w fazie ruchomej, a następnie każdą z próbek filtrowano przy użyciu filtrów strzykawkowych o wielkości porów 0,2 µm. Po optymalizacji parametrów procesu rozdzielania przystąpiono do wykonania analiz i identyfikacji związków selenu. Za pomocą powyższej metody r...