PCR w mniej niż kwadrans – przegląd nowatorskich technologii na rynku termocyklerów

Całość procesu zamyka się przeciętnie w 30-35 cyklach opisanych wcześniej i zajmuje około 1,5 h. Jak można łatwo zauważyć, wynik ten odbiega od sumy czasu, jaki jest potrzebny do zajścia poszczególnych etapów. Ograniczenie prędkości PCR obecnie najczęściej tkwi w termocyklerach, czyli urządzeniach, które zapewniają cykliczne zmiany temperatury, zaprogramowane przez eksperymentatora [4].

Ślepa uliczka?

Charakterystycznym elementem budowy współczesnych termocyklerów jest blok termiczny, w którym umieszcza się probówki z mieszaniną reakcyjną (rys. 2). Jest on wykonany z metalu o bardzo dobrej przewodności cieplnej, na przykład glinu lub srebra. Zmiany temperatury są generowane z wykorzystaniem modułu Peltiera znajdującego się pod blokiem. Umożliwia on zarówno ogrzewanie bloku, kiedy następuje denaturacja (95°C), reakcja enzymatyczna polimerazy (72°C), jak i chłodzenie bloku, aby uzyskać temperaturę przyłączania starterów (ok. 55°C). Ten parametr reakcji jest kontrolowany w bardzo precyzyjny sposób, gdyż niewielkie odchylenia temperatury mogą przełożyć się na brak powtarzalności wyników. Ogrzewanie i schładzanie bloku (typowo 3°C/s) to nierzadko najdłuższe fazy z całego cyklu, co rzutuje na [...]

Ten materiał dostępny jest tylko dla użytkowników
którzy są subskrybentami naszego portalu.

Wybierz pakiet subskrypcji dla siebie
i ciesz się dostępem do bazy merytorycznej wiedzy!

Wybierz subskrypcję

Masz aktywną subskrypcję?

Zaloguj się

Nie masz jeszcze konta w serwisie? Dołącz do nas