Badania in vitro – kluczowy element rozwoju branży farmaceutycznej

fot. D. Kustosz

Przenikalność

Linią komórkową zasługującą na uwagę w kontekście modeli in vitro jest linia komórkowa Caco-2 wyizolowana z ludzkiego gruczolaka jelita grubego. Komórki linii Caco-2 są bardzo dobrym modelem nabłonka przewodu pokarmowego, zdolnym do tworzenia kosmków oraz specjalnych międzykomórkowych kanałów tworzących połączenia ścisłe (ang. tight junction), dzięki czemu reprezentują fizjologiczne miejsce wchłaniania związków chemicznych dostarczanych drogą pokarmową. Badania przenikalności są prowadzone na liniach komórkowych hodowanych na specjalnych filtrach. Ocena przenikalności przez monowarstwę komórek jest wykonywana z wykorzystaniem substancji referencyjnych (kontrolnych), charakteryzujących się różnym stopniem przenikania. Istotnym parametrem w kontekście badań przenikalności jest pomiar integralności w pełni konfluentnej hodowli poprzez pomiar oporu elektrycznego TEER (ang. transepithelial/transendothelial electrical resistance). Parametr ten jest kluczowy, ponieważ jego zmienność w czasie może istotnie wpływać na ilość substancji przenikającej. Wskaźnikiem mówiącym o stopniu przenikalności substancji przez wytworzony model in vitro jest współczynnik przenikalności, który jest proporcjonalny do średniej ilości przetransportowanej substancji na drugą stronę monowarstwy, a odwrotnie proporcjonalny do stężenia substancji w płynie donor...